《最後的晚餐》畫尺寸是421X903釐米， 畫面利用透視原理， 使觀眾感覺房間隨畫面作了自然延伸。 為了構圖使圖做得比正常就餐的距離更近， 並且分成四組， 在耶穌周圍形成波浪狀的層次。 越靠近耶穌的門徒越顯得激動。 耶穌坐在正中間， 他攤開雙手鎮定自若， 和周圍緊張的門徒形成鮮明的對比。 耶穌背後的門外是祥和的外景， 明亮的天空在他頭上仿佛一道光環。 他的雙眼注視畫外， 仿佛看穿了世間的一切炎涼。
在眾多同類題材的繪畫作品裡， 達芬奇的作品《最後的晚餐》被公認為空前之作， 尤其以構思巧妙， 佈局卓越， 細部寫實和嚴格的體面關係而引人入勝。 構圖時， 達芬奇將畫面展現於飯廳一端的整塊牆面， 廳堂的透視構圖與飯廳建築結構相聯結， 使觀者有身臨其境之感。 畫面中的人物， 其驚恐， 憤怒， 懷疑， 剖白等神態， 以及手勢， 眼神和行為， 都刻畫得精細入微、惟妙惟肖。
《最後的晚餐》題材取自聖經故事。 猶大向羅馬人告密， 耶穌在即將被捕前， 與十二門徒共進晚餐， 席間耶穌鎮定地說出了有人出賣他的消息， 達芬奇此作就是耶穌說出這一句話時的情景。
宗教故事：《最後的晚餐》是基督教新約聖經記載的最重要的事件之一， 幾乎被所有宗教畫家描繪過。 但在達芬奇為米蘭格雷契寺院食堂畫《最後的晚餐》之前， 所有的畫家對畫面藝術形象處理都有一個共同的特點：那就是把猶大與眾門徒分隔開， 畫在餐桌的對面， 處在孤立被審判的位置上。 這是因為畫家們對人的內心複雜情感無法表現， 從形象上難以區別善惡。 由於達芬奇對人的形象和心理作過深入的觀察和研究， 能從人物的動作、姿態、表情中洞察人物微妙的心理活動並表現出來。
當時請達芬奇作畫是按時付酬金的，後幾天不動筆使院長十分惱火，並打算扣達芬奇的工資。院長將想法通過總管告訴達芬奇，達芬奇說了停筆的原因。總管雖能理解，但扣工資非他本意，而是承院長旨意。這時達芬奇轉首看看院長，立即表示可以很快完成猶大的形象，如果實在找不到猶大的模特兒，就把院長的頭像畫成猶大，總管會意地笑了。後來米蘭大公來看芬奇已完成的畫，一見坐在猶大位置上的是院長，他笑了，並說：我也收到修士們的指控，說他克扣修士們的薪金，他和猶大是一個樣的，就讓他永遠地坐在這裡吧。大公對芬奇說：“他對你不公平，你巧妙地報復了他。”達·芬奇之所以用院長作模特兒，並非完全是出於個人的報復，而是發現院長和猶大都很貪婪金錢，他們在本質上是一致的。所以猶大是作為貪財、叛賣、邪惡的典型而進入達芬奇的作品的。
這幅在格雷契修道院食堂牆壁上的宏大畫面，嚴整、均衡，而富於變化，無論從構思的完美、情節的緊湊，人物形象的典型塑造以及表現手法的純熟上都堪稱畫家藝術的代表。它也是人類最優秀的繪畫作品之一，由於它的問世而使達芬奇名揚世界。
觀賞者可以從自己的生活經驗出發，對畫中人作出不同的心理分析。畫家描繪的弟子們的心理和情態，在現實生活中都可以找到相似的模特兒，可是叛變者的形象是很難畫的。達芬奇為塑造猶大的形象已停筆幾天，他常站在畫前沉思。
當時請達芬奇作畫是按時付酬金的，後幾天不動筆使院長十分惱火，並打算扣達芬奇的工資。院長將想法通過總管告訴達芬奇，達芬奇說了停筆的原因。總管雖能理解，但扣工資非他本意，而是承院長旨意。這時達芬奇轉首看看院長，立即表示可以很快完成猶大的形象，如果實在找不到猶大的模特兒，就把院長的頭像畫成猶大，總管會意地笑了。後來米蘭大公來看芬奇已完成的畫，一見坐在猶大位置上的是院長，他笑了，並說：我也收到修士們的指控，說他克扣修士們的薪金，他和猶大是一個樣的，就讓他永遠地坐在這裡吧。大公對芬奇說：“他對你不公平，你巧妙地報復了他。”達·芬奇之所以用院長作模特兒，並非完全是出於個人的報復，而是發現院長和猶大都很貪婪金錢，他們在本質上是一致的。所以猶大是作為貪財、叛賣、邪惡的典型而進入達芬奇的作品的。
這幅在格雷契修道院食堂牆壁上的宏大畫面，嚴整、均衡，而富於變化，無論從構思的完美、情節的緊湊，人物形象的典型塑造以及表現手法的純熟上都堪稱畫家藝術的代表。它也是人類最優秀的繪畫作品之一，由於它的問世而使達芬奇名揚世界。
